哺乳動物骨髓細胞柔色體畸變驗

一、哺乳動物骨髓細胞柔色體畸變驗

染色體型畸變:染色體結構損傷，表現為在兩個染色單體的相同位點均出現斷裂或斷烈重組的改變染色單體型畸變:染色體結構損傷，表現為染色單體斷裂或染色單體斷裂重組的損傷。染色體數目畸變:哺乳,動物細胞染色體數目的改變。

二、試驗原理

使哺乳動物(如大鼠或小鼠)經口或其他適宜途徑染毒，動物處死前用細胞分裂中期阻斷劑處理，處死后制備骨髓細胞染色體標本，分析染色體畸變。

本方法特別適用于需考慮體內代謝活化后的染色體畸變分析

三、受試物要求

固體受試物需溶解或懸浮于溶劑中。

液體受試物可直接使用或予以稀釋。

四、測試方法

1.頸椎脫的法處死動物，取出股骨，剔除肌肉等組織

2.剪去股骨兩端，注射器5mL生理鹽水從股骨一端注入，10mL離心管從股骨另一端接取流出的骨髓細胞懸液3.將細胞懸液以1000r/min 的速度離心5 min-7 min，去除上清液。

4加入0.075mol/L KCI溶液7ml處理

5.加入7mL固定液處理。

6.用混懸液以空氣干燥或火焰干燥法制片。用姬姆薩染液染色

7.計數畸變細胞。

8.結果評價:結構畸變細胞率和每細胞內的染色體暗變數作為評價指標.陽性結果證明受試物具有引起該種受試動物骨髓細胞染色體畸變的能力陰性結果表明在本試驗條件下受試物不引起該種受試動物骨髓細胞染色體畸變