病毒滅活能力試驗懸液該怎么制備？

　　病毒滅活能力試驗是一種十分重要的試驗過程，做病毒的殺滅效果試驗檢測，首先需要根據(jù)具體的產(chǎn)品具體的病毒滅活分析，病毒滅活效果驗證，要找可靠具備CMA資質(zhì)認證的病毒殺滅試驗檢測中心機構(gòu)。--廣東省華微檢測股份有限公司。

　　病毒滅活能力試驗的病毒懸液制備方法？

　　1、從液氮中取出冷凍的測試宿主細胞，在37°C的溫水中迅速融化，并使用毛細管吸管將其移植到細胞中含維護溶液的細胞管中，移液幾次以混合，立即離心（3000r/min，3min），并除去上清液。然后添加適當(dāng)?shù)募毎S持溶液，移液幾次以混合，然后如上所述離心后，轉(zhuǎn)移到含有10種培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中。每天觀察細胞生長，并在單層細胞過度生長時將其用于消毒測試。

　　2、取出冷凍保存的測試病毒種類，在37°C水浴中融化，用細胞維持液稀釋10倍，然后接種到已生長有單層細胞的細胞瓶中，將其置于37°C的培養(yǎng)箱中，使其吸附并與細胞一起生長。每天觀察病變，并在3/4個細胞病變時收獲病毒。

　　3、用聲波（或反復(fù)冷凍和融化）破壞含病毒的培養(yǎng)基中的宿主細胞，并在冰浴中破壞宿主細胞以釋放病毒。然后，盡快離心（6000r/min，15min）以除去沉淀物（主要是細胞碎片），上清液即為所需的病毒懸液。每管裝1.0份等分試樣到無菌離心管（1.5）中。

　　4、取病毒懸液，并根據(jù)病毒滴度確定方法確定病毒滴度。將其余的冷凍并儲存在-80℃下以備后用。
 

　　病毒滅活能力試驗的三種原理：

　　1、包膜的破壞：包膜中含有脂質(zhì)，因此包膜的病毒可以被脂質(zhì)溶劑快速破壞，例如氯仿或脫氧膽酸鈉可以使它失活病毒。實際上，病毒對脂質(zhì)溶劑的敏感性可用于檢查病毒是否具有包膜。諸如滲透壓變化，凍結(jié)和解凍，熱量和干燥之類的物理因素可能會損壞外殼。一般認為，呼吸道感染病毒對干燥的抵抗力較弱，并且傳播主要是直接的人感染，這是由于包膜引起的。

　　2、病毒蛋白質(zhì)變性：可使蛋白質(zhì)變性的化學(xué)試劑可以使病毒失活，例如酚，次氯酸鹽，酸和堿等。。加熱引起的變性也是一種有效的滅活方法。一般而言，該病毒對熱的抵抗力較弱，并且在60°C的幾分鐘內(nèi)，該病毒的傳染性顯著降低。因此，當(dāng)分離出病毒時，從患者身上采集的標本需要在低溫下保存，并迅速送到實驗室，并在-80下保存以進行長期保存。低于°C的低溫條件。

　　3、病毒核酸損傷：諸如y射線之類的電離輻射會切斷核酸，紫外線會導(dǎo)致核苷酸鏈上相鄰的嘧啶堿基形成二聚體，從而破壞病毒基因的功能。另外，染料如as啶橙或中性紅可以與病毒核酸結(jié)合，暴露于光下可以分解核酸并使滅活的漿果失活。